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BIOGHSC一步法超级荧光定量PCR试剂盒(探针)说明书

放大字体  缩小字体 发布日期:2016-02-06  浏览次数:159
核心提示:产品特点◎逆转录和定量PCR在一个反应管内一步完成,操作简便快速;◎使用我们最新研发的超级热启动聚合酶,反应特异性更高,酶
 产品特点

◎逆转录和定量PCR在一个反应管内一步完成,操作简便快速;

◎使用我们最新研发的超级热启动聚合酶,反应特异性更高,酶动力更强,特别适合多重PCR反应;

◎反应缓冲液经充分优化,灵敏度高,最低可检测1pg总RNA中的目标片段,特别适合低拷贝RNA的检测;                     

◎添加了百代生物RT-PCR专利活素,可明显提升RT-PCR的产量,CT值一般早3-5循环,S型曲线更加典型。

产品介绍  

BIOGHSC Super MultiProbe One Step Kit专为以RNA为模板的定量PCR检测而设计,适合荧光探针法定量PCR分析。使用BIOGHSC Super MultiProbe One Step Kit,逆转录和定量PCR在一个反应管内一步完成,中间无开管和移液动作,操作非常简便,也大大提高了实验的效率,并降低了反应的污染风险。BIOGHSC Super MultiProbe One Step Kit使用我们最新研制优化的缓冲液,确保了反转录和定量PCR反应能够快速、高效地完成。BIOGHSC Super MultiProbe One Step Kit的检测灵敏度可达到1pg总RNA,与其它品牌的同类产品相比,具有更高的检测灵敏度。各反应成分以 Mix的形式提供,非常方便实验者使用。

 

产品成分                                                     反应体系 

组    分

100个反应

250个反应

RNase free ddH2O

1ml

1.25mlx2

2×BIOGHSC  Super MultiProbe  Mix

1ml

1.25mlx2

BIOGHSC  Super Enzyme Mix

50ul

125ul

RT-PCR Enhancer

25ul

62.5ul

2xBIOGHSC Super MultiProbe  Mix

10μl

BIOGHSC  Super Enzyme Mix

0.5μl

RT-PCR Enhancer

0.25ul

上下游引物 (10μM)

各0.6μl

TaqMan Probe (10μM)

0.5μl

模板RNA

10ng-1μg

RNase free ddH2O

加至20µl

说明:1、BIOGHSC Super MultiProbe Mix包含dNTP Mix和Mg2+,BIOGHSC Super Enzyme Mix包含BIOG超级逆转录酶和BIOG超级热启动聚合酶、荧光保护素。2、一般来说反应体系中引物终浓度为0.3μM可得到较好的扩增效果。进行多重PCR反应时,不同靶基因引物的浓度搭配可以在0.1-1.0μM范围内进行实验优化。 3、TaqMan探针终浓度可以在0.1μM-0.45μM之间调整,进行多重PCR反应时,不同靶基因探针的浓度搭配应进行实验优化。4、qPCR反应灵敏性高,模板量的准确性对结果影响很大,建议将模板适度稀释后加入,或用50ul反应体系。5、模板体积最好不超过反应体积的10%。6、扩增产物长度请选择在100bp-500bp范围内,最好为100-200bp。 7、配制反应体系时,避免震荡混匀,以防气泡产生。8、反应条件:先于42℃逆转录反应20分钟,再于95℃加热10分钟,以激活热启动DNA聚合酶,然后95℃ 15秒,60℃ 35秒,35-40个循环。该反应条件可根据目标片段的大小、引物的Tm值、检测基因的多少等适当调整。8、如果模板具有复杂二级结构,可将反应温度提高至55℃,有助于提高产量。

 


储存和稳定性  

干冰或蓝冰运输,-20°C 储存,避免反复冻融 。  

如每次使用量较少,推荐小份分装使用。

有效期

-20℃保存条件下,有效期为1年。

质量控制

所有组分经检测均无核酸外切酶,核酸内切酶,RNase残留。

注意 

本产品仅用于科研


               

 
 
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