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shRNA质粒制备

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技术简介：
近年来的研究表明，将与mRNA对应的正义RNA和反义RNA组成的双链RNA(dsRNA)导入细胞，可以使mRNA发生特异性的降解，导致其相应的基因沉默。这种转录后基因沉默机制(post-transcriptional gene silencing, PTGS)被称为RNA干扰（RNAi）。编码shRNA的载体生产的siRNA制备质量可控性好，带有抗生素标记的载体可以在细胞中持续抑制靶基因的表达，持续数星期甚至更久，可以大量扩增。
早期的shRNA表达载体多采用RNA聚合酶III启动子，如人源U6、H1、7SK或鼠源U6启动子，后有部分研究报道了利用某些优化方案将RNA聚合酶II启动子引物shRNA表达载体中。以上特定的真核启动子在哺乳动物细胞内引导非编码性小RNA的转录，转录出的产物是经折叠形成的发夹状小RNA（ShRNA），shRNA在细胞内经Dicer酶切割成3端带有两个U突出的SiRNA，进而启动RNAi，介导基因沉默。
shRNA表达载体较之别的siRNA制备方案有着许多的优点，如制备质量可控性好，带有抗生素标记的载体可以在细胞中持续抑制靶基因的表达，持续数星期甚至更久，可以大量扩增等，使其受到越来越多科研工作者的青睐。

服务内容：
1．一个载体编码一条ShRNA质粒表达服务
在完成对合个单条shRNA抑制效果的筛选后，可利用晶赛公司专利的多表达构建方案，将各有效的最多达六条shRNA构建在同一个质粒上。
2．一个载体编码两条ShRNA质粒表达服务(一次完成载体构建，无表达单条shRNA载体)
当您已经筛得两条有效序列，或是在可靠文献中得到两条有效序列时，或是想同时封闭两个基因时，此一服务将是您的理想选择。
3．一个载体编码四条ShRNA质粒表达服务(一次完成载体构建，无表达单条shRNA载体)
根据大部分文献报道及经验，通常四条siRNA中可以筛选出一条比较高效的siRNA序列。晶赛公司的四条shRNA质粒表达载体可以为您在最短地时间内完成一个载体编码四条shRNA的构建服务，从而可以避免筛选的巨大工作量，缩短时间周期，节省实验经费。
晶赛公司的前期近50次实验结果表明，49个四shRNA表达载体可以在mRNA水平抑制目的基因达90%以上。

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