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NHS磁珠|蛋白直接偶联磁珠

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最后更新: 2018-09-09 17:45
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公司基本资料信息
 
 
产品详细说明
 【产品简介】

PuriMag G-NHS是在单分散的磁珠表层键合高密度的NHS功能基团,能够与带有伯胺基团的蛋白和其他分子形成稳定的酰胺键,与传统的羧基、氨基磁珠相比,表面含NHS基团的磁珠无需事先采用EDC/NHS或戊二醛进行活化,只需简单地将含伯氨基的生物配体溶解于偶联缓冲液中,室温条件下便可将生物配体共价偶联到磁珠上,具有操作简单、偶联条件温和、生物配体偶联快速、高效等优点。也可采用自动化设备操作,自动化操作适合用于多样品的筛选。

 

【产品特性】

 

1. PuriMag GS-NHS (NHS group density >400μmol/g)

 

2. PuriMag GL-NHS (NHS group density >200μmol/g)

 

Magnetization: ~60-80 EMU/g (Superparamagnetic); 

Number: ~4×1010 beads /mg; Density:  2.5 g/ml 

Bead size: ~ 200nm diameter; Surface area: ~5 m2/g;

Composition: N-hydroxysuccinimide (NHS) functional groups on a blocked magnetic bead surface

Concentration: 10mg/mL in DMAC (Dimethylacetamide)

Binding Capacity: ≥ 60 µg of rabbit IgG/mg of beads

Beads are stable for 6 months when stored at 2-8 °C.

 


【注意事项】

1.NHS 基团容易水解,对湿度敏感,用完磁珠后立即盖紧盖子,用封口膜封口,可短期存放在 4℃。也可存放于-20℃的低温环境中长期保存,但是存放温度不得低于-20℃,防止凝固; 

2.请勿离心、干燥或者冷冻磁珠,这些操作可能导致磁珠的聚集从而降低结合活性; 

3.可通过间接法测定反应前后蛋白含量,或通过直接法检测偶联到磁珠表面的蛋白含量。使用 280nm 附近的波长来测定蛋白含量是不可取的,因为 NHS 基团在 280nm 波长附近有很强的吸收,会严重干扰检测结果; 
4. 蛋白稳定剂(如 BSA,gelatin)会抑制抗体与磁珠的结合,因此在磁珠偶联抗体过程中,需要确保抗体保存体系中不存在含伯氨基的蛋白稳定剂; 
5. 缓冲液中含有带伯胺的物质会抑制蛋白质偶联到磁珠表面,去除伯胺物质可采用透析和脱盐的方法;
6. 蛋白和磁珠的偶联效率因蛋白质种类和性质差异而不同。一般而言,最佳的蛋白偶联浓度为 0.1-2.0mg/ml,但对于不同的蛋白其最优浓度需要优化。 

For example:

IgG (150KD)>60 (µg/mg of bead)

Streptavidin (53 KD)> 40 (µg/mg of bead)

Protein A/G (53 KD)> 35(µg/mg of bead)

Protein L (36 KD)> 65 (µg/mg of bead)

备注:结合量与蛋白上可利用的伯氨基数量有关。
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