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艰难梭菌毒素A+B抗原检测试剂盒

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品牌: 德国DRG
规格: 96T
货号: EIA-4448
单价: 面议
起订: 1 盒
供货总量:
发货期限: 自买家付款之日起 3 天内发货
所在地: 广东省 深圳
有效期至: 长期有效
最后更新: 2018-11-17 08:50
浏览次数: 29
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公司基本资料信息
 
 
产品详细说明
 艰难梭菌毒素A+B抗原检测

ELISA操作试剂准备过程及问题解答

1)试剂盒和样本不平衡,直接打开后进行检测

2)浓缩试剂如洗涤液等未进行稀释,直接使用;

3)冻干试剂溶解不充分,解冻样本使用前不混匀;

4)标准品稀释不当,酶标试剂配制时间不当

解决办法:

1) 试剂盒使用前应整体取出,在室温下平衡30min后再进行测定;

2) 根据产品标签或说明书要求,对浓缩试剂采用适当的溶剂稀释,并按要求保存或使用;

3) 冻干试剂溶解后,要放置15min左右,使用前再次混匀;冻存样本溶解后,可轻轻振荡混匀,如有颗粒或沉淀,需离心后取上清备用。

4) 标准品如需稀释,按照说明书要求进行,稀释量至少多于加样量的20%。部分酶标试剂要求加样前现配现用,应按照要求配制,避免提前配制导致酶的失活。

通用名称:艰难梭菌毒素A+B抗原检测
英文名称:C. difficile toxin A+B antigen detection

公司品牌:德国DRG
储存条件:2-8℃
检测方法:ELISA方法
预期用途:用于定性检测粪便和细胞上清液中的艰难梭菌毒素A+B抗原。
参考价格:询价
产品货号:EIA-4448
产品规格:96T
检测样本:粪便、细胞上清液
供应商家:深圳市科润达生物工程有限公司 


艰难梭菌毒素A+B抗原检测预期用途
       艰难梭菌毒素A+B抗原检测仅用于体外检测,定性检测粪便和细胞上清液中的艰难梭菌毒素A+B抗原。

艰难梭菌简介
       艰难梭菌是人类肠道内的正常菌群,如果过度服用抗生素,艰难梭菌就会变成致病菌。Hall 和 O’Toole在1935年将此菌分类到了可产生毒素的菌群中。艰难梭菌的毒素株会产生两类毒素:毒素A,肠毒素;毒素B,细胞毒素。直到1970后期,人们发现了艰难梭菌与伪膜性肠炎有所关联时才确定艰难梭菌是致病菌。伪膜性肠炎是一类与抗生素相关联的疾病,主要发生腹泻和急性粘膜坏死性炎症,从而形成由纤维蛋白、粘液层、坏死上皮细胞和白血球构成的克隆伪膜性肠炎。
        尽管在50%多的无症状克隆婴儿患者的粪便中发现了艰难梭菌毒素,而且还有高浓度的毒素A和毒素B,但是只有少数会最终患有PMC(伪膜性肠炎),剩余的都是无症状的。对于这种现象可能的原因包括:母乳能够中和毒素A和毒素B,胎儿肠细胞对毒素A的敏感度降低,或者是缺乏毒素受体。少数病例显示,囊性纤维变性患者对PMC(伪膜性肠炎)敏感度降低。诊断抗生素与结肠炎相关的最普遍的临床方法是细胞培养和乳胶凝集试验。
        细胞培养试验可以发现毒素B对细胞的一个影响作用,这个试验的敏感度很高(50pg/ml毒素B),但是最少也要2天才可以完成。乳胶凝集是一种可以通过粪便来筛查出与艰难梭菌相关联的蛋白质的方法,即使交叉反应和不会产生毒素的艰难梭菌也会被检测出来。很多研究者已表明酶联免疫法可以检测出1-10ng/ml的毒素A或是毒素B。

艰难梭菌毒素A+B抗原检测检测原理
        检测粪便中的艰难梭菌毒素A+B抗原利用的是夹心法。粪便或者细胞上清液中的艰难梭菌和阳性质控与包被孔中的单克隆抗毒素A和B抗体反应,温育后,未连接的成分被洗涤除去。然后在第二次温育中连接到包被孔的毒素会特异性地与生物素化的多克隆抗毒素A和B抗体反应,未连接的材料会被洗涤除去。
        在下一步的温育中,辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素会与生物素化的抗体反应,经洗涤步骤除去未连接酶联物。然后加入底物显色液TMB,显蓝色,加入终止液终止反应,溶液由蓝色变成了黄色。在酶标仪上读取吸光度,吸光度直接与艰难梭菌毒素A和B的量成正比例。经与临界值比较,可以判定结果为阳性或者阴性。

艰难梭菌毒素A+B抗原检测组成

 
名称 描述 标志
反应板 含有抗艰难梭菌毒素A+B抗体的96孔板 MT PLATE
浓缩洗涤液 (10X) 100 ml浓缩缓冲液(10倍浓缩),可稀释至1000ml。白盖 WASH  BUF
样本稀释液 100ml,即用,红色,黑盖 DIL
阳性质控品 2 ml 艰难梭菌阳性样本,即用,蓝色,黑盖 CONTROL  +
阴性质控品 2ml 艰难梭菌阴性样本,即用,蓝色,绿盖 CONTROL  –
生物素化的抗体 生物素化的多克隆抗毒素A和B抗体(兔)
15 ml,即用,绿色,白盖
CONJ  BIOTIN
酶联物 15ml链霉亲和素标记的辣根Catalase,即用,红色,棕色盖 CONJ  STREPT
显色液 15 ml TMB显色和hydrogen peroxide,即用,蓝盖 SUBS TMB
终止液 15 ml 0.25 M流酸,即用,黄盖 SOLN

艰难梭菌毒素A+B抗原检测试剂的制备和保存

        各成分的有效期见于各自的标签,完整的试剂盒有效期见于盒子标签。收到试剂盒后,最好放在原始的试剂盒箱子里于2-8℃保存。所有的成分开瓶后,在适当的保存条件下,至少可以稳定2个月。稀释后的洗涤缓冲液在2-8℃,至少可以保存1个月。

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