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HMGB1试剂盒

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品牌: 德国IBL
货号: ST51011
规格: 96T
单价: 面议
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所在地: 广东省 深圳
有效期至: 长期有效
最后更新: 2019-12-10 08:32
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公司基本资料信息
 
 
产品详细说明
HMGB1试剂盒(ELISA法)

通用名称:人高迁移率族蛋白检测试剂盒(ELISA法)
英文名称:HMGB1 ELISA  
产品规格:96T
产品货号:ST51011
产品品牌:德国IBL

HMGB1试剂盒预期用途
HMGB1试剂盒可用于定量测定人血清和血浆中的HMGB1含量。此外,该试剂盒可用于来自牛,猪,兔,小鼠和大鼠的血清,血浆和脑脊液(CSF)的研究。也可以检测细胞培养基和BALF(支气管肺泡液)。

前言简介
HMGB1是大约30kDa的蛋白质,是非组蛋白核蛋白组的主要成分。HMGB1(高迁移族Box1蛋白)是转录调节因子,通常存在于哺乳动物细胞的细胞核和细胞质中。
 
HMGB1在恶性疾病等疾病的发病机理中起重要作用。在肿瘤的情况下,细胞的氧供应可以断开。 这导致细胞死亡(坏死)和释放HMGB1,进而导致在相邻肿瘤环境中形成朝向肿瘤的血管生成。这些血管确保肿瘤的存活和进一步的生长。
 
体外研究表明,通过定量测定HMGB1浓度,可以区分病理性细胞死亡(坏死)和生理细胞死亡(细胞凋亡)。在坏死中观察到更高的HMGB1值。HMGB1在脓毒性休克后期也起重要作用。 结果表明,即使在脓毒性休克后期,HMGB1在动物实验中的抑制显着提高了啮齿动物的存活率。HMGB1通过与RAGE(“晚期糖基化终产物的受体”)结合起作用,具有与细胞因子TNF-α和IL-6相似的促炎作用。 脓毒症患者血清中也可见高值。血液中的HMGB1浓度在许多其他疾病中也增加,包括类风湿性关节炎(RA)急性肺损伤(ALI)和弥散性血管内凝血(DIC)。HMGB1 ELISA由Ikuro Maruyama博士和Shino-Test Corporation(日本)开发。本产品由Shino-Test公司授权的IBL制造。

HMGB1试剂盒检测原理
HMGB1试剂盒是用于定量测定血清和血浆中HMGB1的夹心酶免疫测定。 微量滴定板孔用纯化的抗HMGB1抗体包被。样品中的HMGB1特异性结合固相的抗体,并被第二个酶标记的抗体识别。底物反应后,HMGB1浓度由颜色强度决定。

HMGB1试剂盒组成成分
数量 标签 组成
1 x 12 x 8 MTP 微孔板可拆卸,包被有抗HMGB1多克隆抗体
1 x ENZCONJ  LYO 酶标记物  冻干粉含有与过氧化物酶结合的HMGB1,2 。
1 x CAL   LYO 标准品 冻干粉含有猪HMGB1 ,稀释见章节10.1
1 x CONTROL+   LYO 阳性质控  冻干粉含有猪HMGB1 ,稀释见章节10.1
1 x 20 mL DILBUF 稀释液即用型,含有:缓冲液,0.01 % NaN3.
1 x 12 mL ENZCONJ DIL 酶标记物稀释液即用型,含有:缓冲液
2 x 100 mL WASHBUF   CONC 洗涤液  5X浓缩含有:磷酸盐缓冲液,<0.5 %Tween 20.
1 x 6 mL COLREA   A 底物液A即用型。
1 x 6 mL COLREA   B 底物液B即用型
1 x 12 mL COLOUR  STOP 终止液即用型,含有:0.35M硫酸
2 x FOIL 盖板膜

所需材料(未提供)
1. 微量移液器(Multipette Eppendorf或类似设备,CV <3%)。 体积:10; 20; 100; 100-1000μL
2. 涡街搅拌机
3. 轨道摇床(500 rpm)
4.  8通道微量移液器
5. 洗瓶,自动或半自动微量滴定板清洗系统
6. 能够读取450nm吸光度的酶标仪(参考波长600-650nm)
7. 双蒸水或去离子水
8. 纸巾,吸头和定时器
9. 聚苯乙烯(PS)或聚丙烯(PP)管用于标准和样品稀释
10. + 37°C和+ 25°C孵育箱
HMGB1试剂盒

储存条件
HMGB1试剂盒在环境温度下运输,储存应在2-8°C。 远离热源或阳光直射。 样品和制备的试剂的储存和稳定性在相应的章节中有描述。开封的微量滴定板条在试剂盒的有效期限内保持稳定,但应在密封的袋子中储存在2-8°C。

HMGB1试剂盒检测步骤
1 分别加入100ul稀释液到相应的板孔中。
2 分别加入10ul稀释液到板中的空白孔。
3 分别加入10ul标准品,阳性质控及血清或血浆样本到相应的孔中,短暂摇动30s。
4 用盖板膜盖板,在+37℃温育20-24h。
5 移去盖板膜,弃去溶液,用稀释好的洗涤液400ul/孔洗涤板孔5次,用吸水纸拍干多余的液体。
6 每孔加入100ul酶标记物。
7 盖板膜盖板,+25℃温育2 h。
8 移去盖板膜,弃去溶液,用稀释好的洗涤液400ul/孔洗涤板孔5次,用吸水纸拍干多余的液体。
9 为了添加显色液和终止液,如果有的话,可以使用8通道微量移液器。移液应在底物液和终止液加液时的相同时间间隔内进行。使用正位移并避免形成气泡
10 每孔 加入100ul显色液。
11 室温(18-25°C)孵育30min。
12 每孔加入100ul终止液终止反应,将内容物轻轻混合摇匀。
13 清理板孔背面。 小心不要划伤板孔,因为这可能会干扰测量。
14 60min内在450nm(参考波长600-650nm)处读取吸光度值。

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代理商:深圳市科润达生物工程有限公司
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